Crk II Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402415-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Crk IIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Crk II (h) e o Plasmídeo Double Nickase Crk II (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Crk II Anticorpo (B-4): sc-390132
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Crk II Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402415-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Crk II Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402415-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRK codifica a Crk II, uma proteína adaptadora com domínios SH2/SH3 que conecta motivos de tirosina fosforilados a efetores a jusante que controlam a transdução de sinal. A Crk II participa de vias de integrinas e de receptores de fatores de crescimento ao ligar proteínas como p130CAS/BCAR1 e GEFs da família DOCK à sinalização de GTPases Rho, regulando assim a remodelação de actina, a adesão celular, a migração e a sobrevivência. Devido ao seu papel na dinâmica das adesões focais e em redes associadas a MAPK/PI3K, alterações na sinalização de CRK são frequentemente estudadas em contextos de transformação oncogênica, invasão e fenótipos associados à metástase. A desregulação de complexos mediados por Crk II também tem sido investigada em modelos de sinalização do desenvolvimento aberrante e de vias de resposta ao estresse relevantes para a biologia de doenças humanas.
Crk II O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.