Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CMAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409575
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CMAS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CMAS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CMAS Anticorpo (E-8): sc-398296
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CMAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409575 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CMAS codifica a citidina monofosfato N-acetilneuramínico ácido sintetase, uma enzima nuclear que catalisa a conversão de Neu5Ac em CMP-Neu5Ac, o substrato doador ativado necessário para reações de sialilação no aparelho de Golgi. Ao controlar a disponibilidade de CMP-ácido siálico, a CMAS influencia a sialilação de glicoproteínas e glicolipídios, afetando interações célula–célula, sinalização de receptores, reconhecimento imunológico e estabilidade de proteínas na membrana plasmática. A atividade da CMAS conecta o metabolismo central de carboidratos à biossíntese de glicoconjugados na via do ácido siálico e em redes mais amplas de glicosilação. Padrões alterados de sialilação associados à disfunção desregulada de CMAS são relevantes para estudos de distúrbios congênitos da glicosilação, fenótipos do neurodesenvolvimento e remodelamento da superfície celular em câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CMAS (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CMAS em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CMAS, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CMAS na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CMAS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CMAS para a investigação da sinalização de CMAS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CMAS críticos para a função CMAS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CMAS para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CMAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CMAS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CMAS. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CMAS Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CMAS (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CMAS para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CMAS definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.