Plasmide Double Nickase (h) CLK4: sc-404084-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CLK4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CLK4 Double Nickase (h) et le plasmide CLK4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CLK4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CLK4 | sc-404084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CLK4 | sc-404084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La CDC-like kinase 4 (CLK4) est une protéine kinase à double spécificité qui phosphoryle les facteurs d’épissage riches en sérine/arginine (SR), reliant les signaux de signalisation à l’assemblage du spliceosome et aux décisions d’épissage alternatif des pré-ARNm. En modulant la dynamique de phosphorylation des protéines SR, CLK4 contribue à la maturation des ARNm, au couplage transcription–épissage et à des programmes plus larges de métabolisme de l’ARN qui façonnent la progression du cycle cellulaire et l’expression génique adaptative en réponse au stress. Une activité dérégulée de la famille CLK peut modifier les profils d’épissage, influençant les réseaux de signalisation oncogéniques, les réponses aux dommages de l’ADN et les états de différenciation, faisant de CLK4 un nœud pertinent pour des études mécanistiques des phénotypes associés à l’épissage. La CLK4 humaine est donc fréquemment étudiée dans des contextes où le basculement des isoformes transcriptomiques et le contrôle de l’épissage régulé par des kinases sont au cœur de comportements cellulaires liés aux maladies.
CLK4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CLK4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CLK4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CLK4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CLK4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.