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CLK1双切口酶质粒(h) | sc-402793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLK1双切口酶质粒(h2) | sc-402793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人源 CLK1(CDC-like kinase 1)是一种双特异性激酶,可磷酸化富含丝氨酸/精氨酸(SR)的蛋白及其他剪接因子,从而调控剪接体动态与 pre-mRNA 的可变剪接。通过调节外显子包含、RNA 加工及下游转录本同工型,CLK1 影响细胞周期进程、应激反应以及与增殖信号相关的转录程序。CLK1 的活性与 RNA 代谢通路及转录后基因调控网络相交织,这些网络共同塑造不同组织间的蛋白质组多样性。CLK1 介导的剪接调控失衡与癌症生物学和神经系统疾病研究中观察到的异常同工型表达模式相关,因此可作为研究剪接依赖性表型的关键机制节点。
CLK1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CLK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CLK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CLK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CLK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。