Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD97 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-404492-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD97 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD97, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD97 Anticorpo (G-8): sc-166852
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD97 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-404492-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ADGRE5 codifica o CD97, um receptor acoplado à proteína G do tipo adesão (GPCR) expresso de forma proeminente em leucócitos, que medeia interações célula–célula e célula–matriz. O CD97 sofre processamento autoproteolítico e sinaliza por meio de proteínas G heterotriméricas, influenciando a remodelação do citoesqueleto, a migração e o posicionamento de células imunes, integrando sinais de componentes da matriz extracelular e de proteínas reguladoras do complemento. Por suas funções na adesão e no tráfego de leucócitos, o CD97 contribui para a dinâmica do microambiente inflamatório e tem sido estudado em contextos de desregulação imune e de interações tumor–sistema imune. Sua atividade conecta a sinalização dependente de adesão a vias a jusante que moldam a quimiotaxia, a infiltração tecidual e a comunicação intercelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD97 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADGRE5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADGRE5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADGRE5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD97.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADGRE5 para a investigação da sinalização de CD97, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADGRE5 críticos para a função CD97
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADGRE5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD97 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CD97 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADGRE5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD97 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CD97 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADGRE5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADGRE5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.