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CD362/SDC2/Syndecan-2CRISPR激活质粒(h) | sc-401392-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
CD362/SDC2/Syndecan-2CRISPR激活质粒(h2) | sc-401392-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SDC2 编码 Syndecan-2(CD362),这是一种跨膜型硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,负责组织细胞周围基质,并作为生长因子、趋化因子及细胞外基质配体的共受体发挥作用。Syndecan-2 通过协调与整合素、Src 家族激酶以及 Rho GTPase 信号的相互作用,调控黏着斑动力学、细胞骨架重塑与细胞迁移,并对 FAK/ERK 和 Wnt/β-catenin 等下游通路产生影响。SDC2 还可通过胞外结构域剪切(ectodomain shedding)参与细胞—细胞通讯与蛋白酶活性调节,从而影响血管生成及炎症性微环境。SDC2 表达失调与肿瘤细胞侵袭、纤维化相关重塑以及基质信号改变相关,因此可作为疾病相关信号研究中的关键机制节点。
CD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SDC2的表达。
CD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SDC2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SDC2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CD362/SDC2/Syndecan-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SDC2位点,并能够研究内源性位点上依赖于CD362/SDC2/Syndecan-2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SDC2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CD362/SDC2/Syndecan-2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。