CD21 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401352-LAC

CR2 kodiert CD21 (Komplementrezeptor 2), einen auf B‑Zellen angereicherten Oberflächenrezeptor, der an C3d‑markierte Antigene bindet und angeborene Komplementsignale mit der adaptiven humoralen Immunität verknüpft. CD21 wirkt innerhalb des CD19‑CD81‑Korezeptorkomplexes, senkt die Aktivierungsschwelle von B‑Zellen, verstärkt die BCR‑Signalübertragung und fördert die Antigenaufnahme sowie -retention auf follikulären dendritischen Zellen, wodurch Keimzentrumsreaktionen geprägt werden. Über diese Funktionen beeinflusst CR2/CD21 Prozesse wie komplementabhängige Opsonisierung, B‑Zell-Reifung und die Bildung immunologischen Gedächtnisses. Eine dysregulierte CR2‑Expression oder -Signalgebung wird mit veränderten B‑Zell-Antworten in autoimmunen und infektiösen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht und wird in Studien zur B‑Zell-Biologie häufig als Marker und funktioneller Knotenpunkt genutzt.

CD21 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CR2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD21 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CR2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD21-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CR2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.