CD1C Double Nickaseプラスミド (h): sc-403813-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD1C Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD1Cダブルニカースプラスミド（h）およびCD1Cダブルニカースプラスミド（h2）は、CD1Cを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CD1C 抗体 (B-6): sc-390980
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD1C Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403813-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD1C Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403813-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD1CはCD1cをコードしており、CD1cはMHCクラスI様の抗原提示分子として、脂質および糖脂質抗原を結合してT細胞に提示し、獲得免疫における抗原認識を形成します。CD1cは主に樹状細胞の一部サブセットで高発現しており、自然免疫の感知からT細胞プライミングへとつながるエンドソーム輸送および抗原ロード（搭載）過程に関与します。CD1に制限された抗原提示を介して、CD1cは免疫応答の偏り（polarization）や、宿主防御および炎症制御に関わるサイトカインプログラムに影響を与えます。CD1c発現樹状細胞の量的変化や機能異常は、自己免疫、感染、腫瘍関連炎症における免疫調節異常と関連づけられており、そのためCD1Cは免疫学的機構の研究に有用な解析ポイント（ノード）となります。
CD1C ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CD1C 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CD1C内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CD1Cの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CD1Cが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。