CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400648-KO-2

Visão geral

CNR1 codifica o receptor canabinoide 1 (CB1), um receptor acoplado à proteína G predominantemente neuronal que transduz sinais endocanabinoides para regular a liberação de neurotransmissores e a plasticidade sináptica. O CB1 acopla-se principalmente a proteínas Gi/o para inibir a adenilil ciclase, modular a sinalização de cAMP/PKA e ativar vias MAPK/ERK, ao mesmo tempo em que influencia a atividade de canais iônicos e a dinâmica do cálcio pré-sináptico. Por esses mecanismos, o CB1 contribui para o controle, em nível de circuitos, de recompensa, nocicepção, apetite, responsividade ao estresse e neuroinflamação. A desregulação da sinalização de CNR1 tem sido associada a fenótipos neuropsiquiátricos e a características metabólicas, sustentando seu uso como um nó molecular para estudar a sinalização cérebro–corpo e o controle homeostático.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CNR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CNR1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CNR1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CNR1 para a investigação da sinalização de CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CNR1 críticos para a função CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CNR1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CNR1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CNR1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CNR1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.