casein kinase IIα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418515-NIC

CSNK2A1 codifica a subunidade alfa catalítica da caseína quinase II (CK2α), uma quinase de serina/treonina constitutivamente ativa que fosforila diversos substratos envolvidos na transdução de sinais, no controlo transcricional e na degradação/reciclagem de proteínas. A CK2α atua em vias que regulam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no ADN e a sinalização de stress, e modula processos associados à cromatina através da fosforilação de fatores nucleares. A desregulação da atividade de CSNK2A1/CK2 tem sido associada a alterações na sinalização de crescimento e a redes de fosforilação aberrantes observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo cancro e perturbações do neurodesenvolvimento. Como um nó central na fosforregulação, a CK2α é frequentemente estudada para mapear circuitos dependentes de quinases e para definir dependências específicas do contexto em células humanas.

casein kinase IIα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CSNK2A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CSNK2A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CSNK2A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CSNK2A1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.