Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) CAR: sc-419887-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CAR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CAR Double Nickase (m) et le plasmide CAR Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cxadr. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CAR Antibody (E-1): sc-373791
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CAR | sc-419887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CAR | sc-419887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cxadr code le récepteur des coxsackievirus et des adénovirus (CAR), une molécule d’adhésion cellulaire de la superfamille des immunoglobulines, concentrée au niveau des jonctions serrées des épithéliums et des endothéliums. CAR contribue à l’adhésion intercellulaire, à la polarité apico-basolatérale et à l’organisation des jonctions via des interactions avec des protéines d’échafaudage et des régulateurs du cytosquelette, ce qui le relie à des voies contrôlant l’intégrité de la barrière et la morphogenèse tissulaire. Dans des modèles murins, les modifications d’expression ou de localisation de CAR sont étudiées dans le contexte de la biologie de l’entrée virale, du développement et de la conduction cardiaques, ainsi que de l’homéostasie épithéliale, faisant de Cxadr un nœud utile pour explorer les interactions hôte–pathogène et la signalisation dépendante des jonctions.
CAR Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cxadr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cxadr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cxadr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cxadr.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.