C11orf51 Plasmide Double Nickase (h): sc-407279-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C11orf51 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C11orf51 Double Nickase Plasmid (h) e il C11orf51 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANAPC15. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C11orf51 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C11orf51 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANAPC15 (annotato anche come C11orf51) codifica una piccola subunità regolatoria del complesso promotore dell’anafase/ciclosoma (APC/C), una ligasi E3 dell’ubiquitina che coordina la progressione ordinata attraverso la mitosi e la fase G1 indirizzando regolatori chiave del ciclo cellulare alla degradazione proteasomiale. Attraverso l’ubiquitinazione dipendente da APC/C, ANAPC15 contribuisce al controllo dei checkpoint, all’avvio tempestivo dell’anafase e al mantenimento della stabilità genomica. La disregolazione della composizione o dell’attività di APC/C è ampiamente associata a fenotipi di instabilità cromosomica rilevanti per i disordini proliferativi e la biologia dei tumori, rendendo ANAPC15 un bersaglio utile per analizzare i meccanismi di controllo mitotico. Nelle cellule umane, la perturbazione di ANAPC15 offre un punto d’ingresso agevole per studiare la segnalazione ubiquitina–proteasoma, la dinamica del checkpoint del fuso e la tempistica del ciclo cellulare.
C11orf51 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANAPC15 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANAPC15. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANAPC15. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANAPC15 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.