C/EBP δ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400772

Visão geral

CEBPD codifica o fator de transcrição C/EBPδ, uma proteína de zíper de leucina básica que regula programas de expressão gênica associados à sinalização imune inata, às respostas ao estresse celular e à diferenciação. O C/EBPδ é induzido por estímulos inflamatórios e participa de redes transcricionais a jusante de vias de citocinas e de receptores do tipo Toll (TLR), moldando a expressão de mediadores envolvidos em funções de fase aguda e relacionadas à linhagem mieloide. Ele também interage com o controle do ciclo celular e com vias de sobrevivência, contribuindo para uma regulação dependente do contexto da proliferação, da senescência e da adaptação metabólica. Atividade desregulada de CEBPD tem sido relatada em diferentes condições inflamatórias e em múltiplos contextos de câncer, sustentando seu uso como um nó mecanístico para estudar o controle transcricional em estados de sinalização relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C/EBP δ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CEBPD em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CEBPD, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CEBPD na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C/EBP δ.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CEBPD para a investigação da sinalização de C/EBP δ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CEBPD críticos para a função C/EBP δ
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CEBPD para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo C/EBP δ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo C/EBP δ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CEBPD. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo C/EBP δ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR C/EBP δ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CEBPD para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CEBPD definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.