BMPR-IA Plasmide Double Nickase (m): sc-419350-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BMPR-IA Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BMPR-IA Double Nickase Plasmid (m) e il BMPR-IA Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bmpr1a. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BMPR-IA Plasmide Double Nickase (m) | sc-419350-NIC | 20 µg | $410.00 |
Bmpr1a codifica BMPR-IA (ALK3), un recettore chinasi di tipo I a serina/treonina per le proteine morfogenetiche dell’osso (BMP) che trasduce segnali tramite SMAD1/5/9 per regolare programmi trascrizionali che controllano la definizione dei pattern embrionali, la differenziazione osteogenica e condrogenica e l’omeostasi tissutale. In seguito alla formazione, dipendente dal ligando, di un complesso con i recettori BMP di tipo II, BMPR-IA promuove la segnalazione canonica della via BMP/TGF-β, nonché un cross-talk dipendente dal contesto con le cascate MAPK che influenzano proliferazione, apoptosi e impegno di linea cellulare. Nei topi, un’attività alterata di Bmpr1a compromette la morfogenesi dello sviluppo e il rimodellamento scheletrico ed è utilizzata per modellare disfunzioni della via rilevanti per malformazioni congenite, rimodellamento associato a fibrosi e biologia dell’osso. Queste caratteristiche rendono BMPR-IA un nodo centrale per analizzare le decisioni di destino cellulare dipendenti dalle BMP nello sviluppo e in fenotipi cellulari rilevanti per la malattia.
BMPR-IA Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bmpr1a nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bmpr1a. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bmpr1a. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bmpr1a interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.