beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-419239-LAC

Atp1b3 kodiert die β3‑Untereinheit der Na⁺/K⁺‑ATPase, eines essenziellen Enzymkomplexes der Plasmamembran, der elektrochemische Na⁺‑ und K⁺‑Gradienten aufrechterhält, die für Membranpotenzial, osmotische Homöostase und sekundär aktiven Transport erforderlich sind. Durch die Unterstützung ionenabhängiger Prozesse beeinflusst ATP1B3 die zelluläre Erregbarkeit, die Nährstoffaufnahme, die Volumenregulation sowie Signalwege, die mit epithelialer Polarität und der Aktivierung von Immunzellen verknüpft sind. Eine veränderte Zusammensetzung oder Expression von Na⁺/K⁺‑ATPase‑Untereinheiten wird mit gestörter Barrierefunktion, aberranter inflammatorischer Signalübertragung und Stressantworten in Verbindung gebracht, die für die Biologie kardiovaskulärer, neurologischer und metabolischer Erkrankungen relevant sind. In Mausmodellen kann die Modulation der Atp1b3‑Expression dazu beitragen, zu untersuchen, wie die Ionentransport‑Maschinerie die Gewebephysiologie sowie Reaktionen auf Verletzung oder Entzündung koordiniert.

beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Atp1b3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Atp1b3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Atp1b3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.