Plásmido Doble Nickase (h) beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR: sc-400660-NIC

ADRB1 codifica el receptor β1-adrenérgico humano (β1-AR), un receptor acoplado a proteína G que se acopla principalmente a Gs para estimular la adenilato ciclasa, elevar el AMPc y activar programas de fosforilación dependientes de PKA. En tejidos excitables y modelos celulares relevantes, la señalización de ADRB1 modula el manejo del calcio, las respuestas contráctiles y electrofisiológicas, y la transcripción dependiente de la actividad a través de AMPc/PKA y efectores posteriores como CREB. El β1-AR también activa vías de desensibilización y tráfico mediadas por GRKs y β-arrestinas, que determinan la internalización del receptor, su resensibilización y el sesgo de señalización. La señalización adrenérgica desregulada que involucra a ADRB1 se estudia con frecuencia en el contexto de la fisiopatología cardiovascular y la biología de la respuesta al estrés, y la variación genética o reguladora en ADRB1 puede influir en la expresión del receptor y en la dinámica de su señalización.

beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADRB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADRB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADRB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADRB1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.