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BECN1/Beclin-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400139-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
BECN1/Beclin-1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400139-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
BECN1 编码 Beclin-1 蛋白,它是 III 类磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3KC3/VPS34)复合物的核心支架,该复合物负责启动自噬体的成核并协调自噬通量。Beclin-1 通过与 ATG14、UVRAG、AMBRA1 以及 BCL2 家族蛋白相互作用,整合营养感知与应激信号,从而调控自噬、内体-溶酶体运输以及膜动态。依赖 BECN1 的自噬参与线粒体质量控制、蛋白质稳态与先天免疫反应,将其与细胞生存和炎症调控通路联系起来。BECN1 及 Beclin-1 复合物的失调与多种疾病中自噬异常有关,包括肿瘤生物学、神经退行性疾病、感染以及其他溶酶体功能与应激适应受扰的病症。
BECN1/Beclin-1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BECN1 表达。
BECN1/Beclin-1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BECN1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BECN1/Beclin-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BECN1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。