BCAS2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-426956

Übersicht

Bcas2 kodiert BCAS2, eine evolutionär konservierte Komponente des Prp19-assoziierten Spleißosomenkomplexes, die das Spleißen von prä-mRNA und die Auswahl von Spleißstellen unterstützt. BCAS2 ist zudem an der Regulation der Transkription sowie an Signalwegen zur Genomstabilität beteiligt und wurde über die Modulation von Checkpoint- und DNA-Schadensantwort-Signalgebung mit der Progression des Zellzyklus in Verbindung gebracht. In Mausmodellen kann eine Störung von BCAS2 alternative Spleißprogramme und nachgeschaltete Genexpressionsnetzwerke verändern, die Proliferation, Differenzierung und Stressantworten beeinflussen. Eine dysregulierte BCAS2-Expression oder Spleißdefekte unter Beteiligung von BCAS2-assoziierten Komplexen wurden im Kontext der Tumorbiologie und anderer Erkrankungen untersucht, bei denen fehlerhafte RNA-Prozessierung zu Krankheitsmechanismen beiträgt.

Das BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Bcas2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Bcas2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Bcas2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BCAS2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Bcas2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BCAS2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Bcas2-Exone abzielen, die für die BCAS2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Bcas2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Bcas2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BCAS2 HDR-Plasmid (m) und BCAS2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Bcas2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Bcas2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.