ATP5G3 Double Nickase Plasmid (h): sc-403317-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ATP5G3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ATP5G3 Double-Nickase-Plasmid (h) und ATP5G3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ATP5G3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ATP5G3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403317-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATP5G3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403317-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP5G3 kodiert die Unterheit c des Fo-Sektors der mitochondrialen ATP-Synthase, eine zentrale Komponente der oxidativen Phosphorylierung, die die Protonentranslokation über die innere Mitochondrienmembran mit der ATP-Produktion koppelt. Durch die Unterstützung der durch die protonenmotorische Kraft angetriebenen Rotation des c-Rings trägt ATP5G3 zur mitochondrialen Bioenergetik, zur Aufrechterhaltung des Membranpotenzials und zur Regulation der Homöostase reaktiver Sauerstoffspezies bei. Eine dysregulierte ATP-Synthase-Aktivität und veränderte Expression von ATP-Synthase-Untereinheiten werden häufig im Kontext mitochondrialer Dysfunktion, metabolischer Umprogrammierung und bioenergetischer Stressantworten untersucht, die für Neurodegeneration, kardiometabolische Phänotypen und den Stoffwechsel von Krebszellen relevant sind. ATP5G3 ist daher ein nützliches Ziel, um die Leistungsfähigkeit der mitochondrialen Atmungskette und nachgeschaltete Signalwege im Zusammenhang mit der zellulären Energiesensorik zu untersuchen.
ATP5G3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ATP5G3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ATP5G3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ATP5G3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ATP5G3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.