Atg9a Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408011-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Atg9aO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Atg9a (h) e o Plasmídeo Double Nickase Atg9a (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATG9A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Atg9a Anticorpo (F-3): sc-518179
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Atg9a Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Atg9a Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATG9A codifica a Atg9a, o único fator central de autofagia com múltiplas passagens transmembranares necessário para a biogênese eficiente de autofagossomos. A Atg9a trafega entre a rede trans-Golgi, endossomos e locais de montagem do fagóforo para sustentar a entrega e a remodelação de membranas, coordenando etapas iniciais da macroautofagia e de vias de autofagia seletiva. Por meio de seus papéis no tráfego vesicular, no manejo de lipídios e na degradação dependente de lisossomos, ATG9A influencia a proteostase e a adaptação celular ao estresse por falta de nutrientes. A autofagia dependente de ATG9A desregulada tem sido associada à neurodegeneração, à biologia de infecções e à tolerância ao estresse relevante para o câncer, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos de fenótipos ligados à autofagia.
Atg9a O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATG9A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATG9A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATG9A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATG9A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.