Atg4b Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404173-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Atg4bO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Atg4b (h) e o Plasmídeo Double Nickase Atg4b (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATG4B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Atg4b Anticorpo (231CT21.1.7): sc-517310
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Atg4b Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404173-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Atg4b Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404173-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATG4B codifica a Atg4b, uma protease cisteína que processa proteínas da família ATG8, incluindo LC3 e GABARAP, preparando-as para a lipidiação e reciclando-as por meio da deslipidiação durante a maturação do autofagossomo. Por meio dessas etapas, a Atg4b regula o fluxo autofágico, a mitofagia e a remoção de proteínas e organelas danificadas, conectando-a à adaptação ao estresse celular e à homeostase metabólica. A modulação da via de autofagia por ATG4B se cruza com a sinalização de mTOR e AMPK e influencia a apresentação de antígenos e respostas imunes inatas. A atividade desregulada de ATG4B e a dinâmica alterada da autofagia têm sido associadas à biologia do câncer, à neurodegeneração e a fenótipos inflamatórios, tornando o ATG4B um ponto útil para estudos mecanísticos de proteostase.
Atg4b O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATG4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATG4B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATG4B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATG4B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.