Plásmido Doble Nickase (m) ARID1A: sc-430047-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ARID1A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARID1A (m) y el plásmido de doble nickasa ARID1A (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Arid1a. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARID1A Anticuerpo (PSG3): sc-32761
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ARID1A | sc-430047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) ARID1A | sc-430047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Arid1a de ratón codifica ARID1A, una subunidad de unión al ADN del complejo SWI/SNF (BAF) de remodelación de cromatina dependiente de ATP, que modula el posicionamiento de los nucleosomas para regular programas transcripcionales. ARID1A ayuda a coordinar la accesibilidad de potenciadores (enhancers) y promotores, e influye en el control del ciclo celular, la especificación de linaje, las respuestas al daño del ADN y la estabilidad del genoma mediante efectos amplios sobre la arquitectura de la cromatina. En sistemas de mamíferos, la alteración de la función de ARID1A se asocia fuertemente con un control epigenético desregulado y una diferenciación deficiente, lo que la convierte en un nodo clave para estudiar cambios impulsados por la cromatina en la proliferación y la señalización de respuesta al estrés. Por ello, Arid1a se utiliza ampliamente en modelos murinos para investigar las vías de remodelación de la cromatina y sus funciones en fenotipos celulares relevantes para enfermedades.
ARID1A El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Arid1a en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Arid1a. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Arid1a. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Arid1a alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.