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Aquaporin 2/AQP2双切口酶质粒(h) | sc-400402-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aquaporin 2/AQP2双切口酶质粒(h2) | sc-400402-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AQP2 编码水通道蛋白 2(aquaporin‑2),这是一种受加压素调控的水通道,在肾集合管主细胞中介导跨细胞的水重吸收。其向顶端膜的转运受 AVPR2 介导的 cAMP/PKA 信号通路控制,并通过磷酸化依赖的方式在囊泡插入与回收之间动态调节,从而将 AQP2 与上皮细胞极性和渗透压稳态联系起来。AQP2 的表达量、定位或通道功能发生改变,会导致尿液浓缩能力受损,并参与水代谢平衡障碍,例如肾性尿崩症以及低钠血症相关状态。作为一种肾脏富集的膜蛋白,AQP2 也常用于研究内体回收、膜蛋白质量控制以及激素调控的转运通路。
Aquaporin 2/AQP2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AQP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AQP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AQP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AQP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。