Ape2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407307

개요

인간 APEX2 유전자는 무염기/무피리미딘(AP) 엔도뉴클레이스 2(Ape2)를 암호화하며, Ape2는 무염기(abasic) 부위를 인식하고 DNA 염기 절제 복구(base excision repair) 및 유전체 유지에 관여하는 뉴클레이스이다. Ape2는 손상된 DNA 말단의 처리에 기여하고, 산화 손상 및 복제 관련 병변에 대한 세포 반응을 지원함으로써 복제 스트레스 관리와 체크포인트 신호전달과 그 활성이 연결된다. DNA 손상의 축적과 해소에 영향을 미침으로써 APEX2 기능은 암을 비롯해 DNA 복구 능력 저하와 연관된 여러 질환에서 관찰되는 돌연변이 유발(mutagenesis)과 염색체 불안정성의 기저 기전과 관련이 있다. 따라서 APEX2는 DNA 손상 반응 경로 간 크로스토크, 산화 스트레스 생물학, 그리고 복구 경로 선택과 같은 맥락에서 자주 연구된다.

Ape2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 APEX2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 APEX2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 APEX2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ape2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ape2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 APEX2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ape2 기능에 중요한 APEX2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 APEX2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ape2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Ape2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 APEX2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ape2 HDR 플라스미드 (h) 및 Ape2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 APEX2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 APEX2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.