Plásmido Doble Nickase (h) alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4: sc-402561-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 (h) y el plásmido de doble nickasa alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATP1A4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 | sc-402561-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 | sc-402561-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP1A4 codifica la subunidad catalítica alfa 4 de la Na⁺/K⁺-ATPasa, una ATPasa de tipo P que mantiene gradientes transmembrana de Na⁺ y K⁺ esenciales para el potencial de membrana, el equilibrio osmótico y el transporte activo secundario. Al acoplar la hidrólisis de ATP al intercambio de iones, ATP1A4 influye en la señalización intracelular vinculada a la homeostasis iónica, la excitabilidad celular y los procesos de transporte epitelial. La alteración de la actividad de la Na⁺/K⁺-ATPasa puede modular vías que implican el manejo del calcio y la señalización de quinasas aguas abajo, proporcionando un punto de entrada mecanístico para estudiar respuestas al estrés y la regulación dependiente de iones de la fisiología celular. Aunque ATP1A4 es más conocida por sus funciones en biología reproductiva, su actividad de bombeo iónico sustenta investigaciones más amplias sobre cómo las subunidades de la bomba contribuyen a la fisiología específica de tejidos y a fenotipos celulares relevantes para enfermedad.
alpha 4 Sodium Potassium ATPase/ATP1A4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATP1A4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATP1A4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATP1A4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATP1A4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.