Plásmido Doble Nickase (h) AKR7A2: sc-403377-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AKR7A2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AKR7A2 (h) y el plásmido de doble nickasa AKR7A2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AKR7A2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AKR7A2 Anticuerpo (Y02): sc-100503
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AKR7A2 | sc-403377-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AKR7A2 | sc-403377-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKR7A2 codifica la aldo-ceto reductasa de la familia 7, miembro A2, una oxidorreductasa citosólica dependiente de NADPH que cataliza la reducción de aldehídos y cetonas reactivos generados durante el metabolismo de xenobióticos y la peroxidación lipídica. Mediante la desintoxicación de especies carbonílicas electrofílicas, AKR7A2 contribuye a la homeostasis redox celular y a la protección frente al estrés oxidativo y carbonílico, conectándose con el metabolismo de aldehídos y con redes metabólicas más amplias de fase I/fase II. La alteración en el manejo de aldehídos reactivos se ha vinculado con lesión tisular e inflamación, y la variación en la actividad de AKR7A2 se estudia en contextos en los que el estrés metabólico y el procesamiento de carcinógenos influyen en la viabilidad celular y la integridad genómica. Estas propiedades hacen de AKR7A2 una diana útil para investigar mecanismos de desintoxicación, señalización adaptativa al estrés y fenotipos de enfermedad asociados al metabolismo en modelos celulares humanos.
AKR7A2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AKR7A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AKR7A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AKR7A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AKR7A2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.