Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ACTR-IIA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418976
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ACTR-IIA El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ACTR-IIA, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACTR-IIA Anticuerpo (D-9): sc-515826
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ACTR-IIA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418976 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Acvr2a codifica el receptor de activina A tipo IIA (ACTR-IIA), un receptor transmembrana con actividad quinasa de serina/treonina que se une a las activinas y a ligandos relacionados de la superfamilia TGF-β para regular la transcripción dependiente de SMAD2/3. En células de ratón, la señalización de ACTR-IIA influye en el patrón embrionario, la regulación del eje reproductivo y la homeostasis tisular al coordinar programas de diferenciación, proliferación y matriz extracelular. Esta vía se interconecta con otros receptores y moduladores de la familia TGF-β para ajustar respuestas específicas según el contexto durante el desarrollo y la remodelación. La desregulación de la señalización activina/ACTR-IIA se ha implicado en la remodelación fibrótica, en cambios tisulares asociados a la inflamación y en alteraciones del control del crecimiento, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos asociados a enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACTR-IIA (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Acvr2a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Acvr2a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Acvr2a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACTR-IIA.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Acvr2a para la investigación de la señalización de ACTR-IIA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Acvr2a críticos para la función de ACTR-IIA
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Acvr2a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ACTR-IIA CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACTR-IIA CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Acvr2a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACTR-IIA (m) y el plásmido HDR ACTR-IIA (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Acvr2a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Acvr2a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.