Acrp30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418962

概要

Adipoq は、脂肪細胞から分泌されるホルモンである Acrp30（アディポネクチン）をコードしており、Acrp30 は多量体として血中を循環し、全身のエネルギーバランスを制御します。Acrp30 は主として ADIPOR1/ADIPOR2 を介してシグナルを伝達し、AMPK および PPARα 経路を調節することで、脂肪酸酸化、グルコース利用、ミトコンドリア生合成に影響を与えます。また、NF-κB 関連シグナル伝達への作用を通じて炎症のトーン（炎症状態）を形成し得ます。マウスモデルでは、Adipoq 発現の変化が脂肪組織機能不全、インスリン抵抗性、肝脂肪化、ならびに動脈硬化関連の表現型と関連することが示されています。これらの特性により、Adipoq はアディポカインシグナル伝達、脂肪組織と肝臓／筋肉の間の代謝クロストーク、そして炎症と代謝の統合の研究における重要な結節点となります。

Acrp30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdipoq遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adipoq内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adipoqのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Acrp30タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Acrp30シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adipoq欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Acrp30の機能に不可欠なAdipoqエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adipoqゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Acrp30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびAcrp30 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adipoq遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Acrp30 HDRプラスミド（m）および Acrp30 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdipoqホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdipoq標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。