Plasmide Double Nickase (h) A-FABP: sc-400756-NIC

FABP4 code pour la protéine de liaison aux acides gras des adipocytes (A‑FABP), un chaperon lipidique cytosolique qui se lie aux acides gras à longue chaîne et régule leur acheminement vers des voies métaboliques et de signalisation. Dans les adipocytes et les macrophages humains, A‑FABP coordonne la gestion des lipides avec des programmes transcriptionnels impliquant la signalisation PPAR, l’expression de gènes inflammatoires et les réponses au stress cellulaire, reliant l’état nutritionnel à des phénotypes immuno‑métaboliques. Une expression altérée de FABP4 a été associée à une adipogenèse dérégulée, à des anomalies de la sensibilité à l’insuline et à l’activation des macrophages, ce qui en fait un marqueur largement utilisé et un nœud mécanistique clé dans les études de l’inflammation liée à l’obésité et des dysfonctions cardiométaboliques. En tant que modulateur de la signalisation médiée par les lipides, A‑FABP est également pertinente pour analyser la communication croisée entre le métabolisme lipidique, la production de cytokines et les états de différenciation cellulaire.

A-FABP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FABP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FABP4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FABP4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FABP4.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.