53BP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403004-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 53BP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase 53BP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase 53BP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TP53BP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:53BP2 Anticorpo (H-4): sc-398311
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
53BP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
53BP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP53BP2 codifica a 53BP2 (também conhecida como ASPP2), uma proteína adaptadora rica em prolina que se liga ao domínio de ligação ao DNA de p53 e modula programas transcricionais que regulam a apoptose, o controle do ciclo celular e as respostas ao estresse. Por meio de interações com membros da família p53 e com componentes de complexos citoesqueléticos e juncionais, a 53BP2 conecta a vigilância do genoma à polaridade celular e à sinalização de sobrevivência. Ela participa de vias associadas à resposta a danos no DNA, à sinalização apoptótica e à regulação de saídas transcricionais que influenciam a aptidão celular. A desregulação da expressão ou da função de TP53BP2 tem sido associada a alterações na atividade da via de p53 e é estudada no contexto da biologia tumoral, da instabilidade genômica e de defeitos na morte celular programada.
53BP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TP53BP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TP53BP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TP53BP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TP53BP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.