β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424741
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β3Gn-T2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β3Gn-T2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424741 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
B3gnt2 codifica a β3Gn-T2, uma β1,3-N-acetilglucosaminiltransferase residente no Golgi que alonga cadeias de poli-N-acetillactosamina em N- e O-glicanos e em glicosfingolipídios. Ao moldar o ramificação e o alongamento dos glicanos, a β3Gn-T2 influencia eventos de reconhecimento mediados por lectinas, incluindo a ligação de galectinas, o que pode afetar a adesão e a migração celulares, bem como a organização de receptores na membrana plasmática. A glicosilação dependente de B3gnt2 contribui para a regulação da sinalização imune e inflamatória e modula a composição do glicocálix em múltiplos tecidos. Alterações na expressão ou na atividade de enzimas da família β3Gn-T têm sido associadas na literatura a interações célula–célula desreguladas e a fenótipos relevantes para a biologia tumoral e a disfunção imune, dando suporte a estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β3Gn-T2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene B3gnt2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do B3gnt2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do B3gnt2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β3Gn-T2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de B3gnt2 para a investigação da sinalização de β3Gn-T2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) B3gnt2 críticos para a função β3Gn-T2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos B3gnt2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo β3Gn-T2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus B3gnt2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β3Gn-T2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR β3Gn-T2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia B3gnt2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo B3gnt2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.