Plásmido Doble Nickase (h) ZIP14: sc-411756-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZIP14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZIP14 (h) y el plásmido de doble nickasa ZIP14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC39A14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZIP14 | sc-411756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZIP14 | sc-411756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC39A14 codifica el transportador de iones metálicos ZIP14, un miembro de la familia ZIP presente en la membrana plasmática y en endosomas, que media la captación celular de cationes divalentes, con funciones destacadas en la homeostasis de zinc y manganeso. La actividad de ZIP14 influye en la función de metaloproteínas, en las respuestas al estrés oxidativo y en la señalización metabólica, y se cruza con vías inflamatorias en hepatocitos y células inmunitarias, donde las señales de citocinas pueden modular la expresión del transportador. La alteración del manejo de metales dependiente de ZIP14 se ha relacionado con cambios en la depuración sistémica de manganeso y con fenotipos de neurotoxicidad, y también se ha estudiado en el contexto del metabolismo hepático y del estrés inflamatorio. En consecuencia, SLC39A14 se utiliza con frecuencia para investigar la regulación dependiente de metales de la actividad enzimática, las redes de transportadores y los programas de adaptación al estrés en modelos celulares humanos.
ZIP14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC39A14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC39A14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC39A14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC39A14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.