Plásmido Doble Nickase (h) ZIP10: sc-406811-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZIP10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZIP10 (h) y el plásmido de doble nickasa ZIP10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC39A10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZIP10 Anticuerpo (1F6): sc-517167
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZIP10 | sc-406811-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC39A10 codifica ZIP10, un importador de zinc de la membrana plasmática que ayuda a regular la disponibilidad intracelular de Zn²⁺ necesaria para la función de las metaloproteínas, el equilibrio redox y el control transcripcional. Al modular la señalización dependiente de zinc y la actividad enzimática, ZIP10 contribuye a procesos como la diferenciación celular, la función de las células inmunitarias y las respuestas al estrés. Las alteraciones del transporte de zinc a través de miembros de la familia ZIP se han vinculado a una proliferación desregulada y a señales inflamatorias en contextos relevantes para enfermedades. El estudio de ZIP10 respalda el trabajo mecanístico sobre las vías de homeostasis de metales y sus efectos posteriores en el metabolismo celular y las redes de señalización.
ZIP10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC39A10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC39A10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC39A10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC39A10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.