Zap-70 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400826

개요

ZAP70는 CD3/ζ 사슬이 LCK에 의해 인산화된 뒤 이어지는 근위부 T 세포 수용체(TCR) 신호전달에 필수적인 세포질 티로신 키나아제인 Zap-70을 암호화한다. Zap-70은 인산화된 ITAM에 모집된 후 LAT, SLP-76과 같은 어댑터 단백질을 인산화하여 PLCγ1 활성화, Ca²⁺ 유입, MAPK 연쇄반응, NF-κB/NFAT 전사 프로그램, 세포골격 재구성을 전달하는 시그널로좀(signalosome)의 조립을 조율한다. 이러한 경로는 흉선세포 선택, T 세포 활성화, 분화 및 효과기 기능을 조절하며, ZAP70의 활성이 면역 항상성과 연결됨을 보여준다. ZAP70 발현 또는 신호전달 역학의 변화는 면역결핍 표현형과 연관되어 왔고, 자가면역 및 혈액학적 질환 맥락에서 관찰되는 림프구 활성 조절 이상과도 관련이 있는 것으로 보고되었다.

Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ZAP70 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ZAP70 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ZAP70의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Zap-70 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Zap-70 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ZAP70 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Zap-70 기능에 중요한 ZAP70 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ZAP70 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Zap-70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ZAP70 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Zap-70 HDR 플라스미드 (h) 및 Zap-70 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ZAP70 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ZAP70 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.