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YB-1 Lentiviral Activation Particles (h) | sc-401385-LAC | 200 µl | $455.00 |
YBX1 kodiert das Y-Box-Bindungsprotein 1 (YB‑1), einen RNA/DNA-bindenden Regulator, der als Reaktion auf zellulären Stress Transkription, mRNA-Spleißen, -Stabilisierung und -Translation koordiniert. YB‑1 ist an Signalwegen beteiligt, die mit der Zellzykluskontrolle, DNA-Schadensantworten und dem Remodeling von Ribonukleoproteinkomplexen verknüpft sind, und beeinflusst dadurch Prozesse wie Proliferation, Apoptose und die epithelial–mesenchymale Transition. Eine fehlregulierte YBX1/YB‑1-Aktivität wird mit onkogenen Signalnetzwerken, Arzneimittelresistenz-Phänotypen sowie inflammatorischen und fibrotischen Programmen in Verbindung gebracht, was YB‑1 zu einem breit untersuchten Knotenpunkt in der Tumorbiologie und in Stressanpassungsmechanismen macht. Als multifunktionelles, nukleinsäurebindendes Protein wird YB‑1 häufig im Hinblick auf seine Rollen in der posttranskriptionellen Genregulation und im Crosstalk von Transkriptionsfaktoren untersucht.
YB-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente YBX1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.
YB-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der YBX1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen YB-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen YBX1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.
Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.