WDTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411657

概要

WDTC1（脂肪細胞分化制御因子としても知られる）は、WDリピートおよびTPRドメインを含むタンパク質をコードしており、脂質貯蔵や脂肪細胞分化プログラムの制御に関与するとされています。報告されている機能から、WDTC1はユビキチン依存的な制御機構や、細胞のエネルギーバランスに影響する転写ネットワークと結び付けられており、その下流で脂肪形成関連遺伝子の発現や代謝恒常性に影響を及ぼします。WDTC1活性の変化は、肥満やより広範な代謝異常に関連する表現型と関連付けられており、脂肪蓄積や栄養応答性シグナル伝達の機序研究に有用です。細胞モデルにおいては、WDTC1を改変することで、脂肪滴の生物学、脂肪細胞分化、代謝ストレス応答を制御する経路の解析に役立ちます。

WDTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるWDTC1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、WDTC1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、WDTC1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、WDTC1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、WDTC1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、WDTC1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• WDTC1の機能に不可欠なWDTC1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、WDTC1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• WDTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびWDTC1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、WDTC1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  WDTC1 HDRプラスミド（h）および WDTC1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWDTC1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWDTC1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。