Villin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400587

개요

VIL1은 빌린(villin)을 암호화하며, 빌린은 상피세포 특이적 액틴 결합 단백질로 장과 신장 근위세뇨관 세포의 솔가장자리(brush border)에 풍부하게 존재합니다. 이곳에서 빌린은 F-액틴을 다발화(bundling)하고, 말단을 캡핑(capping)하며, 절단(severing)함으로써 미세융모(microvilli) 구조를 형성하고 유지합니다. Ca2+ 및 포스포이노시타이드에 의해 조절되는 액틴 재구성을 통해, 빌린은 분화와 재생 과정에서 상피 극성, 정단면(apical surface)에서의 막 수송, 그리고 장벽 기능을 지지합니다. VIL1은 장세포 계통과 상피 성숙의 표지자로 널리 사용되며, 빌린의 발현 또는 세포 내 위치 변화는 위장관 손상 및 염증 환경뿐 아니라 상피성 종양 생물학에서도 보고되어 왔습니다. 이러한 특성 때문에 VIL1은 세포골격 역학, 상피 형태형성, 그리고 미세융모 유지 메커니즘을 연구하기 위한 실용적인 표적으로 간주됩니다.

Villin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 VIL1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 VIL1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 VIL1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Villin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Villin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 VIL1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Villin 기능에 중요한 VIL1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 VIL1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Villin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Villin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 VIL1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Villin HDR 플라스미드 (h) 및 Villin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 VIL1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 VIL1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.