Plásmido Doble Nickase (m) VDAC2: sc-423662-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)VDAC2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa VDAC2 (m) y el plásmido de doble nickasa VDAC2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Vdac2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) VDAC2 | sc-423662-NIC | 20 µg | $410.00 |
Vdac2 codifica el canal aniónico dependiente de voltaje 2 (VDAC2), una porina principal de la membrana externa mitocondrial que regula el intercambio de metabolitos e iones entre el citosol y las mitocondrias. VDAC2 es un organizador clave de la homeostasis mitocondrial, e influye en la fosforilación oxidativa, la señalización por especies reactivas de oxígeno y la permeabilidad de la membrana mitocondrial. A través de interacciones con proteínas de la familia BCL-2, VDAC2 contribuye al control de la apoptosis intrínseca y a la dinámica mitocondrial, vinculando la bioenergética con las decisiones sobre el destino celular. La desregulación de las vías asociadas a VDAC2 se ha implicado en contextos de metabolismo mitocondrial alterado, respuestas al estrés y susceptibilidad a la muerte celular, aspectos de amplia relevancia para la biología del cáncer, la neurodegeneración y la investigación cardiometabólica.
VDAC2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Vdac2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Vdac2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Vdac2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Vdac2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.