Plásmido Doble Nickase (m) USP18: sc-423988-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)USP18 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP18 (m) y el plásmido de doble nickasa USP18 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Usp18. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) USP18 | sc-423988-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino Usp18 codifica la peptidasa específica de ubiquitina 18 (USP18), una enzima desISG15ilante específica de ISG15 que también actúa como un regulador negativo clave de la señalización del interferón de tipo I. USP18 atenúa la salida de la vía JAK–STAT al limitar la señalización asociada a IFNAR2 y ayuda a moldear los programas transcripcionales antivirales e inflamatorios aguas abajo de los genes estimulados por interferón. Mediante el control de la ISG15ilación y de la respuesta a citocinas, USP18 influye en la homeostasis inmunitaria innata, la activación de células mieloides y la adaptación al estrés celular. La actividad desregulada de USP18 se ha relacionado con respuestas anómalas al interferón relevantes para la autoinflamación, la biología de las infecciones y las interacciones tumor-inmunidad, lo que convierte a Usp18 en un locus útil para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por interferón en modelos murinos.
USP18 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Usp18 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Usp18. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Usp18. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Usp18 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.