USP12 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406586

Descripción general

USP12 (peptidasa específica de ubiquitina 12) es una enzima desubiquitinante que regula la estabilidad de las proteínas y la señalización al eliminar cadenas de ubiquitina de sustratos seleccionados. Actúa en el control dependiente de ubiquitina de la homeostasis celular, influyendo en procesos como el tráfico de receptores, las respuestas al estrés y la proteostasis mediante la modulación de la dinámica del sistema ubiquitina–proteasoma. La actividad de USP12 se ha vinculado con la regulación de nodos clave de señalización, incluidas vías asociadas con AKT y con la señalización del receptor de andrógenos, lo que la conecta con un control dependiente del contexto de la proliferación y de los programas transcripcionales. La desregulación de la expresión o la función de USP12 se ha asociado con la biología tumoral y otros trastornos en los que una edición alterada de la ubiquitina perturba la amplitud de la señalización y el recambio proteico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO USP12 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen USP12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del USP12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de USP12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USP12.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en USP12 para la investigación de la señalización de USP12, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de USP12 críticos para la función de USP12
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de USP12 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido USP12 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido USP12 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus USP12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USP12 (h) y el plásmido HDR USP12 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología USP12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana USP12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.