USP11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403368

Übersicht

USP11 ist eine humane ubiquitinspezifische Protease, die Ubiquitin von Proteinsubstraten entfernt und dadurch deren Stabilität, Lokalisation und Signalweiterleitung reguliert. Durch Deubiquitinierung trägt USP11 zur Kontrolle der Proteostase bei und moduliert Signalwege, die mit DNA-Schadensantworten, der Regulation der Transkription und dem Fortschreiten des Zellzyklus verknüpft sind. Berichtetete Interaktionen verorten USP11 in ubiquitinabhängigen regulatorischen Netzwerken, die Stress-Signalwege und chromatinassoziierte Prozesse beeinflussen. Eine fehlregulierte USP11-Aktivität wurde mit veränderter Kontrolle des Zellwachstums und Phänotypen der Genomstabilität in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für die Krebsbiologie und andere Erkrankungen mit gestörter Ubiquitin-Signalgebung unterstreicht.

Das USP11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des USP11-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des USP11-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von USP11 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die USP11-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von USP11-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der USP11-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf USP11-Exone abzielen, die für die USP11-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere USP11-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom USP11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom USP11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des USP11-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das USP11 HDR-Plasmid (h) und USP11 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von USP11-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten USP11-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.