Usherin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423630

개요

Ush2a는 감각 상피의 섬모주위막 복합체(periciliary membrane complex)에 풍부하게 존재하는, 세포외기질(ECM) 연관 대형 막관통 단백질인 usherin을 암호화하며, 이곳에서 기계감각 구조를 지지하고 장기적인 세포 무결성을 유지하는 데 기여한다. 마우스에서 usherin은 세포 접착, 섬모 수송, 그리고 세포골격 결합에 관여하는 단백질 복합체들을 조율함으로써, 스테레오실리아의 조직화와 광수용체의 유지에 기여한다. USH2A의 이상은 어셔 증후군 II형과 망막색소변성과 강하게 연관되어 있으며, 이 유전자가 섬모 의존적 신호전달과 감각신경 세포 항상성을 조절하는 경로와 연결됨을 시사한다. 따라서 Ush2a 기능상실 모델은 망막 및 내이 맥락에서 섬모 수송, 세포외 스캐폴드(지지 구조) 조립, 그리고 퇴행 관련 스트레스 반응을 규명하는 데 활용된다.

Usherin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ush2a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ush2a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ush2a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Usherin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Usherin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ush2a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Usherin 기능에 중요한 Ush2a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ush2a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Usherin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Usherin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ush2a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Usherin HDR 플라스미드 (m) 및 Usherin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ush2a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ush2a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.