UCP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423597

Descripción general

Ucp3 codifica la proteína desacoplante mitocondrial 3 (UCP3), un transportador de la membrana interna que modula la fuga de protones y la eficiencia del acoplamiento durante la fosforilación oxidativa. En el músculo esquelético y el tejido adiposo pardo de ratón, UCP3 se asocia con la utilización de ácidos grasos, la regulación de las especies reactivas de oxígeno mitocondriales y las respuestas termogénicas adaptativas a cambios en la disponibilidad de nutrientes. Al influir en la bioenergética mitocondrial y el manejo de lípidos, UCP3 participa en vías relevantes para la homeostasis energética, la sensibilidad a la insulina y el estrés oxidativo. Las alteraciones en la expresión o la actividad de Ucp3 se examinan con frecuencia en modelos de obesidad, síndrome metabólico y adaptación metabólica del músculo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO UCP3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ucp3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ucp3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ucp3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UCP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ucp3 para la investigación de la señalización de UCP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ucp3 críticos para la función de UCP3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ucp3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido UCP3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido UCP3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ucp3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UCP3 (m) y el plásmido HDR UCP3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ucp3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ucp3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.