Tyrosine Hydroxylase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400273

개요

TH는 카테콜아민 생합성에서 속도 제한 효소로 작용하는 티로신 하이드록실레이스(tyrosine hydroxylase)를 암호화하며, L-티로신을 도파민·노르에피네프린·에피네프린의 전구체인 L-DOPA로 전환하는 반응을 촉매합니다. TH의 활성은 테트라하이드로비오프테린(BH4) 보조인자 가용성, 철(Fe) 의존적 촉매 작용, 그리고 인산화에 의한 조절을 통합해 도파민성 및 노르아드레날린성 뉴런과 부신 크로마핀 세포에서 신경전달물질 산출을 조절합니다. 티로신 하이드록실레이스는 신경세포 분화, 소포성 신경전달물질 적재, 시냅스 신호전달, 그리고 산화환원 균형 및 미토콘드리아 기능과 연관된 세포 스트레스 반응의 핵심 요소입니다. TH 발현 또는 활성의 이상 조절은 도파민 결핍, 카테콜아민성 신호전달 결함, 그리고 신경퇴행과 연관된 신경회로 기능장애 맥락에서 광범위하게 연구되고 있습니다.

Tyrosine Hydroxylase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Tyrosine Hydroxylase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Tyrosine Hydroxylase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Tyrosine Hydroxylase 기능에 중요한 TH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Tyrosine Hydroxylase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Tyrosine Hydroxylase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Tyrosine Hydroxylase HDR 플라스미드 (h) 및 Tyrosine Hydroxylase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.