TXNL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407201

Übersicht

TXNL1 (Thioredoxin-like Protein 1) ist eine zytosolische Oxidoreduktase mit Thioredoxin-Faltung, die die zelluläre Redoxhomöostase unterstützt, indem sie den Thiol‑/Disulfid-Status von Proteinen moduliert und vor oxidativem Stress schützt. Über seine reduzierende Aktivität kann TXNL1 redoxempfindliche Signalwege, die Proteom-Qualitätskontrolle sowie mit Stoffwechsel und Stressanpassung verknüpfte Prozesse beeinflussen – darunter auch Vorgänge, die die Zellzyklusprogression und das Überleben von Zellen betreffen. Eine dysregulierte Redoxkontrolle und veränderte TXNL1-Expression wurden in Studien zur Krebsbiologie und bei anderen Erkrankungen beschrieben, die durch oxidative Schäden gekennzeichnet sind, was TXNL1 zu einem geeigneten Ziel für mechanistische Untersuchungen redoxabhängiger Phänotypen macht.

Das TXNL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TXNL1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TXNL1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TXNL1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TXNL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TXNL1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TXNL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TXNL1-Exone abzielen, die für die TXNL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TXNL1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TXNL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TXNL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TXNL1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TXNL1 HDR-Plasmid (h) und TXNL1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TXNL1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TXNL1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.