Plásmido Doble Nickase (h) TRIP12: sc-403860-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TRIP12 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TRIP12 (h) y el plásmido de doble nickasa TRIP12 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TRIP12. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TRIP12 | sc-403860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TRIP12 | sc-403860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIP12 codifica una ligasa E3 de ubiquitina (también conocida como ULF) que promueve la ubiquitinación de sustratos y su degradación por el proteasoma, modulando así la homeostasis proteica y la amplitud de la señalización. Está implicada en las respuestas al daño del ADN y en el control del ciclo celular mediante la regulación de vías clave de puntos de control y supresión tumoral, incluida la modulación de la actividad del eje p14ARF–MDM2–p53. Al influir en el control de calidad dependiente de ubiquitina, TRIP12 contribuye a la estabilidad del genoma y a la adaptación celular al estrés. La alteración de la función o la expresión de TRIP12 se ha asociado con proliferación desregulada y fenotipos del neurodesarrollo, lo que la convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y en modelos neuronales.
TRIP12 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TRIP12 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TRIP12. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TRIP12. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TRIP12 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.