Partículas Lentivirales de Activación (h) TRB-1: sc-405781-LAC

TRIB1 (TRB-1) codifica una proteína adaptadora de pseudocinasa que modula la señalización MAPK y los programas transcripcionales al actuar como andamiaje para interacciones proteína–proteína y al influir en la degradación dependiente del proteasoma de reguladores de señalización. En contextos inmunitarios y metabólicos, TRB-1 participa en vías vinculadas a la señalización inflamatoria, la diferenciación mieloide y la homeostasis lipídica, integrando señales que afectan el estado celular y las respuestas al estrés. La expresión alterada de TRIB1 se ha asociado con programas hematopoyéticos desregulados y rasgos cardiometabólicos, lo que lo convierte en un objetivo útil para desentrañar redes transcripcionales y de señalización dependientes del contexto. Los estudios funcionales suelen aprovechar la perturbación de TRB-1 para conectar entradas de vías aguas arriba con cambios de expresión génica aguas abajo y lecturas fenotípicas como proliferación, diferenciación y respuestas de citocinas.

Las partículas de activación lentiviral TRB-1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TRIB1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TRB-1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TRIB1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TRB-1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TRIB1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.