Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TPX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402581
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TPX2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TPX2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TPX2 Anticuerpo (E-2): sc-271570
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TPX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402581 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TPX2 (proteína de direccionamiento para Xklp2) codifica una proteína asociada a los microtúbulos esencial para el ensamblaje y el mantenimiento del huso mitótico, incluida la nucleación de microtúbulos dependiente de Ran-GTP alrededor de los cromosomas y la activación/localización de la quinasa Aurora A en los polos del huso. TPX2 contribuye a la integridad del centrosoma, a la formación de fibras del cinetocoro y a la segregación cromosómica precisa, lo que la vincula con la progresión del ciclo celular y las vías de estabilidad genómica. La expresión desregulada de TPX2 se asocia con frecuencia con fenotipos proliferativos e inestabilidad cromosómica en contextos relacionados con el cáncer, lo que la convierte en un marcador ampliamente utilizado y en un nodo mecanístico en estudios de señalización mitótica. Por lo tanto, TPX2 humana es relevante para investigar la función del punto de control del huso, la aneuploidía y mecanismos de vulnerabilidad impulsados por la mitosis en modelos de investigación biomédica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TPX2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TPX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TPX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TPX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TPX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TPX2 para la investigación de la señalización de TPX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TPX2 críticos para la función de TPX2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TPX2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TPX2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TPX2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TPX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TPX2 (h) y el plásmido HDR TPX2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TPX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TPX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.