TMPRSS11E CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412014

Übersicht

TMPRSS11E kodiert eine Typ-II-Transmembran-Serinprotease, die an epithelialen Oberflächen exprimiert wird, wo perizelluläre Proteolyse die Funktion der Schleimhautbarriere, Zell-Zell-Interaktionen und die Umgestaltung der extrazellulären Mikroumgebung regulieren kann. Als Teil der TTSP-Familie ist TMPRSS11E dafür prädestiniert, proteaseaktivierte Signalwege sowie proteolytische Prozessierungsvorgänge zu beeinflussen, die die epitheliale Differenzierung und entzündliche Antworten mitprägen. Eine fehlregulierte proteolytische Aktivität in Epithelien wurde mit der Pathobiologie der Atemwege und von Plattenepithelien in Verbindung gebracht, wodurch TMPRSS11E ein relevantes Ziel für die Untersuchung von Mechanismen ist, die epithelialen Stressantworten und Gewebeumbau zugrunde liegen. Seine membranverankerte Protease-Architektur unterstützt die Erforschung kompartimentierter Protease-Netzwerke an der Zelloberfläche und deren Einfluss auf nachgelagerte Signalprogramme.

Das TMPRSS11E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TMPRSS11E-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TMPRSS11E-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TMPRSS11E nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TMPRSS11E-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TMPRSS11E-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TMPRSS11E-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TMPRSS11E-Exone abzielen, die für die TMPRSS11E-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TMPRSS11E-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TMPRSS11E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TMPRSS11E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TMPRSS11E-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TMPRSS11E HDR-Plasmid (h) und TMPRSS11E HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TMPRSS11E-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TMPRSS11E-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.