TIN2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404636

개요

TINF2는 텔로미어 말단을 보호하는 셸터린(shelterin) 복합체의 핵심 구성요소인 TIN2를 암호화합니다. TIN2는 TRF1/TRF2 간 상호작용을 조직하고, 말단 보호(end-protection) 기전과 텔로머레이스 접근을 조율함으로써 텔로미어 말단을 안전하게 유지합니다. 이러한 스캐폴딩(발판) 기능을 통해 TIN2는 텔로미어 길이 항상성을 유지하고, 염색체 말단에서 부적절한 DNA 손상 신호가 유발되는 것을 막으며, 텔로미어 반복서열에서 복제 관련 스트레스를 조절하는 데에도 기여합니다. TINF2가 교란되면 텔로미어 캡핑이 손상되고 ATM/ATR 의존적 DNA 손상 반응이 활성화될 수 있어, 셸터린 기능 이상이 유전체 불안정성과 연결됨을 시사합니다. TINF2의 병원성 변이는 텔로미어가 가속적으로 짧아지고 조직 특이적 기능 부전 양상을 보이는 텔로미어 생물학 질환과 연관되어 있어, 텔로미어 유지 기전을 규명하기 위한 기전 연구의 중요한 표적입니다.

TIN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TINF2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TINF2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TINF2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TIN2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TIN2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TINF2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TIN2 기능에 중요한 TINF2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TINF2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TIN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TIN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TINF2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TIN2 HDR 플라스미드 (h) 및 TIN2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TINF2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TINF2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.